四通道超聲波粉碎機(jī),DH4S-2000是一種利用強(qiáng)超聲在液體中產(chǎn)生空化效應(yīng)酒精報(bào)警器,對物質(zhì)進(jìn)行超聲處理的多功能、多用途的儀器,能用于多種動植物細(xì)胞、病毒細(xì)胞的破碎,同時(shí)可用來乳化、分離、勻化、提取、消泡、清洗及加速化學(xué)反應(yīng)等等。被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、微生物學(xué)、藥物化學(xué)、表面化學(xué)、物理學(xué)、動物學(xué)等領(lǐng)域。創(chuàng)新型定制4通道變幅桿探頭,同時(shí)處理4個(gè)樣品,大大提升了實(shí)驗(yàn)效率。
◆用于動植物細(xì)胞、細(xì)菌、芽孢或組織的粉碎,從細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)以及進(jìn)行病毒、疫苗的科學(xué)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。
◆加速化學(xué)、物理學(xué)等的反應(yīng)速度和加速液體脫氣。
◆原油稀釋、油水乳化、加速脫晶,玻璃均漿等進(jìn)行的科研分析。
◆分散稀土煤氣檢測儀,各類無機(jī)礦物質(zhì),以及配制近納米百分之一的乳膠體均化混合物等。
◆模具微孔,盲孔的快速強(qiáng)力高精洗液。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1、了解超聲細(xì)胞破碎的基本原理
2、掌握超聲細(xì)胞破碎的基本技術(shù)
實(shí)驗(yàn)原理
強(qiáng)聲波作用溶液時(shí),氣泡產(chǎn)生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。
材料和試劑
細(xì)菌10ml、燒杯、刨冰、75%酒精棉球。
探頭型號大小
破碎細(xì)胞容量
2mm
150ul-5ml
3mm
200ul-10ml
6mm
10ml-50ml
10mm
50ml-150ml
型號
DH4S-2000
頻率
20-25KHz自動跟蹤
功率
2000W
隨機(jī)變幅桿
Φ6*4支
可選配變幅桿
Φ3*4支(主機(jī)功率為650W-DH4S-650)
破碎容量
10-150ml*4個(gè)樣品
溫度報(bào)警范圍
0-100℃
保護(hù)功能
超溫、超功、超時(shí)
占空比
1-99%
電源
220/110V 50Hz/60Hz
電源機(jī)箱尺寸
400×280×220mm
凈重
12.1kg
主機(jī)+換能器重量
14kg
外包裝尺寸
534×295×435mm
超聲波發(fā)生器
一臺
振動系統(tǒng)(換能器組件)
一套(φ6mm*4支)
電源線
一根
專用扳手(用于拆卸變幅桿)
一套
保險(xiǎn)絲
8A 、5A各2個(gè)
使用說明書
一份
合格證
一張
保修卡
一份
細(xì)胞破碎的方法:
一、機(jī)械破碎法:是指利用搗碎機(jī)、研磨器或勻漿器 等將細(xì)胞破碎開來 。
1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內(nèi)約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調(diào)速器先撥至最慢處,開動開關(guān)后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等。
2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細(xì)胞研碎,此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機(jī)為高酒精探頭酒精探頭,適用于量少和動物臟器組織。
二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細(xì)胞破碎開來。
1:用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,使細(xì)胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動力破碎細(xì)胞壁和細(xì)胞器)。
機(jī)制:可能與強(qiáng)聲波作用溶液時(shí),氣泡產(chǎn)生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。
超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時(shí)間、細(xì)胞濃度和細(xì)胞類型等。(使用時(shí)注意降溫,防止過熱)。
2. 高壓破碎:細(xì)胞懸浮液從高壓室的環(huán)狀隙噴射到靜止的撞擊環(huán)上酒精探頭,被迫改變方向經(jīng)出口管流出。此過程中細(xì)胞經(jīng)歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內(nèi)含物。
這是一種溫和的、徹底破碎細(xì)胞的較理想的方法。
3. 反復(fù)凍融法:將細(xì)胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復(fù)幾次,由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎。
三、化學(xué)破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機(jī)溶劑或表面活性劑作用于細(xì)胞膜,使細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變 。
有些動物細(xì)胞,例如腫瘤細(xì)胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細(xì)胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。
四、酶學(xué)破碎法 :選用合適的酶,使細(xì)胞壁遭到破壞,進(jìn)而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎開來。
細(xì)菌細(xì)胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。
裂解液標(biāo)準(zhǔn)配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在這個(gè)pH范圍內(nèi)比較好發(fā)揮作用) 。
綜合敘述:無論用哪一種方法破碎組織細(xì)胞,都會使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導(dǎo)致天然物質(zhì)量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應(yīng)該在破碎的同時(shí)多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強(qiáng)度等,使這些條件都要適合于目的物質(zhì)的提取。
使用前注意事項(xiàng):
1.根據(jù)所處理的樣本體積選擇適當(dāng)探頭,使用前后均須用酒精棉球擦洗探頭,換探頭須剛專用扳手更換;
2.AMPLITUDE旋鈕打開時(shí),探頭不得在空氣中暴露,特殊情況下(測試探頭)不應(yīng)超過10秒;
3.使用前準(zhǔn)備好冰盒,樣品處理時(shí)必須置于冰浴中,樣品濃度不可過大。
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